生物樣本大都對溫度極其敏感,尤其是細胞樣本、制品。隨著(zhù)細胞治療的快速發(fā)展,細胞冷凍技術(shù)及效果變得更加重要?,F在也有一些冷凍降溫是通過(guò)高溶度的凍存保護劑保障活率,大劑量的凍存保護劑往往對細胞、回輸受體有害,如何安全有效的提高細胞及制劑的冷凍效果,是一個(gè)重要課題。
程序降溫儀是一種高性能,安全可靠的溫變速率可調的冷凍系統,現已廣泛應用于輕工、農、醫、基礎生物研究等各個(gè)領(lǐng)域中,用于組織庫、骨髓細胞、腫瘤細胞,動(dòng)、植物細胞、心肌細胞等的凍存。
程序降溫儀基于控制系統原理,通過(guò)傳感器檢測環(huán)境溫度,并將其與設定的目標溫度進(jìn)行比較。根據差異,控制系統將啟動(dòng)相應的冷卻或加熱裝置來(lái)調整環(huán)境溫度,以使其逐漸接近或保持在目標溫度范圍內。
使用步驟:
1、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長(cháng)期。
2、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜(DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0.1ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ml,混合均勻,分裝于已標示*之冷凍保存管中,1~2ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱(chēng)、代數、日期。然后進(jìn)行凍存。
應用領(lǐng)域:
1、轉基因胚胎研究;
2、干細胞研究;
3、臨床和研究樣本,例如常規冷凍管中的淋巴細胞和組織細胞;
4、各種哺乳動(dòng)物細胞,包括心肌細胞,脂肪,肝和肌肉;
5、臍帶血干細胞;
6、微孔板中的貼壁細胞和干細胞;
7、細胞懸浮液按編號/條形碼分類(lèi)和儲存;
8、機器人集成-CRF-1也已成功集成到機器人系統中;
9、人的和獸醫的IVF(試管受精)。