層析柜是一種高分離率、高靈敏度和高選擇性的分離方法
更新時(shí)間：2024-02-02 點(diǎn)擊次數：3717
層析柜是一種用于分離和純化樣品的設備，它采用了層析技術(shù)，這是一種具有高分離率、高靈敏度和高選擇性的分離方法。
使用原理：
生物分子間存在很多特異性的相互作用，它們之間都能夠專(zhuān)一而可逆的結合，這種結合力就稱(chēng)為親和力。親和層析就是通過(guò)將具有親和力的兩個(gè)分子中一個(gè)固定在不溶性基質(zhì)上，利用分子間親和力的特異性和可逆性，對另一個(gè)分子進(jìn)行分離純化。被固定在基質(zhì)上的分子稱(chēng)為配體，配體和基質(zhì)是共價(jià)結合的，構成親和層析的固定相，稱(chēng)為親和吸附劑。親和層析時(shí)首先選擇與待分離的生物大分子有親和力物質(zhì)作為配體，并將配體共價(jià)結合在適當的不溶性基質(zhì)上。將制備的親和吸附劑裝柱平衡，當樣品溶液通過(guò)親和層析柱的時(shí)候，待分離的生物分子就與配體發(fā)生特異性的結合，從而留在固定相上；而其它雜質(zhì)不能與配體結合，仍在流動(dòng)相中，并隨洗脫液流出，這樣層析柱中就只有待分離的生物分子。通過(guò)適當的洗脫液將其從配體上洗脫下來(lái)，就得到了純化的待分離物質(zhì)。
設備結構：
層析柜通常由以下幾個(gè)部分組成：外殼、工作區域、控制系統等。外殼通常由金屬或耐酸堿塑料制成，主要目的是保護工作區域，防止外界污染，并提供便于清洗和消毒的表面。工作區域通常由內襯不銹鋼的工作面板、前玻璃門(mén)、風(fēng)道系統和高效過(guò)濾器組成，風(fēng)道系統和高效過(guò)濾器可過(guò)濾空氣，并將潔凈空氣輸送至工作區域，防止外部雜質(zhì)進(jìn)入?？刂葡到y則由電子和機械部件組成，包括紫外線(xiàn)照射器、通風(fēng)機和風(fēng)量計等，可保證工作區域的負壓狀態(tài)，確保污染物向層析柜外部排放。
操作步驟：
層析柜的使用操作包括以下幾個(gè)步驟：樣品的準備和處理、層析柱的安裝和平衡、上樣和洗脫、收集和檢測。在操作過(guò)程中，需要注意避免樣品污染和交叉污染，同時(shí)要控制好流速和溫度等參數，保證分離效果和實(shí)驗結果的準確性。
注意事項：
層析柜在使用過(guò)程中需要注意以下幾點(diǎn)：首先，要嚴格按照操作規程進(jìn)行操作，避免人為失誤導致的實(shí)驗失??；其次，要保持設備的清潔和衛生，避免樣品污染和交叉污染；第三，要定期對設備進(jìn)行維護和保養，保證其正常運轉和使用壽命；最后，要注意安全問(wèn)題，如避免超壓運行、避免使用未經(jīng)批準的化學(xué)品等。
